平行反应监测（PRM）是一种基于高分辨率和高精度质谱的离子监测技术。PRM技术的原理与SRM/MRM的原理类似，但在分析方法的开发中，PRM更常用于对蛋白质和多肽进行绝对定量。PRM技术能实现复杂样品中的attomole级别的多种蛋白质的检测。

PRM是以Q-Orbitrap为基础的四极杆高分辨率质谱检测平台。与SRM每次执行一次跃迁不同，PRM通过前体离子对每次跃迁执行全扫描，也就是说，同时监控前体离子的所有碎片：首先，PRM采用四极(Q1)选择前驱体离子，选择范围一般为m/z≤2；然后，前体离子在碰撞细胞中破碎(Q2)；最后，Orbitrap取代Q3，高分辨率和高精度的扫描所有破碎的离子。因此，PRM技术不仅具有SRM/MRM目标的定量分析能力，而且还具有定性能力。

PRM的优势

1. 质量精度可达到ppm级别，比SRM / MRM更好的消除了背景干扰和假阳性问题，有效提高复杂背景下的检测限和灵敏度;
2. 对产物离子进行全扫描，无需选择离子对，更易于分析方法的建立；
3. 较宽的线性范围：增加到5-6个数量级。

SRM/MRM技术的优势

• 高灵敏度；
• 高产量；
• 分析方法更易于开发。

百泰派克生物科技平行反应监测PRM分析主要流程：

1. PRM分析法开发：首先，从质谱库中生成或Skyline软件中选择2种或3种靶向肽。所选的肽对于目标蛋白质应该是唯一的，易于通过LC-MS进行的检测，不能有缺失的切割位点和多次修饰的氨基酸。其次，根据x轴-浓度比，y轴-峰面积比，建立一条标准曲线。
2. 质谱分析：水解后的样品，使用Thermo公司最新的Obitrap Fusion Lumos质谱仪对样品进行质谱分析。
3. 数据分析：使用Skyline软件进行数据分析。

PRM的应用

• iTRAQ中差异蛋白的验证；
• Label Free无标记差异蛋白的验证；
• 多肽和蛋白质绝对定量；
• 量化疾病指标，建立诊断模型；
• 磷酸化蛋白定量，甲基化蛋白定量；
• 其他翻译后修饰蛋白质定量；
• 代谢通路定量分析。

相关服务

MRM/PRM定量蛋白组学分析